-
小鼠皮膚冷凍包埋實(shí)驗(yàn)步驟
發(fā)布時(shí)間： 2021-12-12 點(diǎn)擊次數(shù)： 4767次簡介
對皮膚的冷凍切片進(jìn)行油紅 0 染色可以分析皮脂腺的油脂分泌功能和皮下脂肪層的形態(tài)，常用于小鼠皮膚炎癥及皮脂腺相關(guān)研究。
材料與儀器
器材：液氮、鋁箔、解剖工具、小鼠等試劑：① 多聚甲醛（Sigma-Aldrich）② 冷凍包埋劑步驟
小鼠皮膚冷凍包埋實(shí)驗(yàn)的基本過程可分為如下幾步：A. 對小鼠處以安樂后，從背部剪下方形皮膚組織，將該皮膚貼到干凈的濾紙上，用至少 20 倍體積的 4％ 多聚甲醛固定過夜（20 小時(shí)，＜ 24 小時(shí)）。注意：把皮膚貼到濾紙上時(shí)，用鑷子輕輕把皮膚展開，既不要留下皺褶，也不要太用力拉扯而使組織結(jié)構(gòu)變形。B. 將固定好的皮膚放入裝有蒸餾水的 50 ml 試管中進(jìn)行清洗，清洗過程中可以將試管放于脫色搖床上，用較低的速度輕輕搖動(dòng)約 30 分鐘。C. 將清洗完畢的皮膚放入至少 20 倍皮膚體積的 30％ 的蔗糖溶液（溶于 PB）中，放置于 4 ℃，直到組織下沉到管底。D. 將鋁箔疊成小槽子，加入適量冷凍包埋劑。將皮膚組織從蔗糖溶液中取出，先用包埋劑包裹潤濕兩遍，以去掉原來的水相，再把組織放入小槽子，調(diào)整好方向。E. 馬上小心地把小槽子的底部浸入預(yù)先準(zhǔn)備好的液氮中，注意不要使組織的方向改變。等包埋劑凝固后，把組織塊保存在 -20 ℃ 或 -80 ℃。切片可用于油紅染色或免疫熒光。注意事項(xiàng)
1. 固定液的選擇應(yīng)該根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求確定。多聚甲醛是很常用的固定液，適合進(jìn)行免疫組化，免疫熒光等方面的實(shí)驗(yàn)；如果只是進(jìn)行形態(tài)的觀察（HE 染色），可以選用 Bouin 固定液；如果要進(jìn)行電鏡分析的小體積樣品，則建議采用戊二醛進(jìn)行固定。2. 當(dāng)組織在蔗糖溶液中剛沉下時(shí)，即可包埋。3. 包埋時(shí)要用細(xì)鑷子小心調(diào)整包埋方向，以便今后切片能切到完整的毛囊。以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。
產(chǎn)品中心
Products
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫
-
蛋白研究系列
-
修飾檢測試劑盒
